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磷酸果糖激酶（PFK）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理：PFK催化果糖6-磷酸和ATP生成果糖-1，6-二磷酸和ADP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步一次催化NADH氧化生成NAD﹢，在340nm下測(cè)定NADH下降速率，即可反應(yīng)PFK活性。
磷酸果糖激酶又叫6-磷酸果糖激酶-1（英語Phosphofructokinase；PFK）是一類激酶，可作用于果糖-6-磷酸 (fructose 6-phosphate)。在糖酵解中和己糖激酶、丙酮酸激酶一樣催化的都是不可逆反應(yīng)，因此這三種酶都有調(diào)節(jié)糖酵解途徑的作用。2,6-二磷酸果糖是它的強(qiáng)變構(gòu)激活劑。

可分為兩種，分別產(chǎn)生不同產(chǎn)物：
由磷酸果糖激酶1作用可得果糖-1,6-雙磷酸。 由磷酸果糖激酶2作用可得果糖-2,6-雙磷酸。
該酶會(huì)受到高濃度ATP的抑制，高的ATP濃度
磷酸果糖激酶在呼吸作用中的調(diào)控作用會(huì)使該酶與底物果糖-6-磷酸的結(jié)合曲線從S形變?yōu)殡p曲線型。而檸檬酸就是通過加強(qiáng)ATP的抑制效應(yīng)來抑制磷酸果糖激酶的活性，從而使糖酵解過程減慢。
因磷酸果糖激酶是糖酵解作用的限速酶，因此，對(duì)此酶的調(diào)節(jié)是調(diào)節(jié)酵解作用的關(guān)鍵步驟。

提取液：60mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體40mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存，臨用前加入2.8mL雙蒸水充分溶解備用；試劑三：液體×1支，-20℃保存，臨用前加入260ul雙蒸水充分溶解備用；試劑四：液體×1支，4℃保存，臨用前加入260ul雙蒸水充分溶解備用；
PFK工作液（可測(cè)25個(gè)樣）的配制：取19mL試劑一和1.26mL試劑二充分混勻。
產(chǎn)品說明：
PFK（EC2.7.1.11）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，負(fù)責(zé)將果糖-6-磷酸和ATP轉(zhuǎn)化為果糖-1,6二磷酸和ADP，是糖酵解過程的關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶之一。
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測(cè)定NADH下降速率，即可反映PFK活性。

磷酸果糖激酶（PFK）實(shí)驗(yàn)代測(cè)