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更新時(shí)間:2025-01-29
NAD激酶(NADK)-測(cè)試盒
(貨號(hào):A117-1-1NAD Kinase50T/24 樣)
測(cè)定原理:
NADK 催化 NAD*磷酸化,生成 NADP+,NADP可被 6-磷酸萄脫酶還原為 NADPH:通過(guò)在 340nm 下測(cè)定 NADPH 的增加速率可反映出 NADK 活性的大小。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
水浴鍋、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 ml石英比色皿、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 50mlx1 瓶,4C 保存:
試劑一: 溶劑 25mlx1 瓶,4 保存:
試劑二:溶劑 50mlx1 支,4C 保存:
試劑三:粉劑x1 瓶,-20C 保存:
試劑四:粉劑x1 瓶,-20C 保存。
樣品前處理:
詳見(jiàn)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)關(guān)于樣本處理的說(shuō)明。測(cè)定組織、細(xì)菌和細(xì)胞時(shí)需要測(cè)定蛋白濃度??捎帽舅?/span>A045-2總蛋定量測(cè)試盒(考馬斯亮法或者A045-3A045-4總蛋定量測(cè)試盒(BCA法)進(jìn)行蛋白濃度的測(cè)定。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm,蒸餾水調(diào)零;
2、將溶劑一與溶劑二在 37攝氏度 (哺乳動(dòng)物)或 25攝氏度(其他物種)水浴 15min 以上;
3、工作液I的配制:在試劑三中加入 12ml 溶劑一,充分混勻待用;現(xiàn)配現(xiàn)用;
工作液 II 的配制:在試劑四中加入 45ml 溶劑二,充分混勻待用,現(xiàn)配現(xiàn)用。
4、操作表:
NAD激酶(NADK)-測(cè)試盒