果膠酶測(cè)試盒

（Pectinase Kit DNS 顯色法）

一、測(cè)定原理：

果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸，具有還原性醛基，

與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì)，在540nm有特征吸收峰，

測(cè)定540nm處吸光值變化可計(jì)算得果膠酶活性。

二、測(cè)定意義：

果膠酶（pectinase）是一類分解果膠質(zhì)酶類的總稱，包

括原果膠酶，果膠酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶

四大類，廣泛存在于植物果實(shí)和微生物中，主要用于食品、

釀酒、環(huán)保、醫(yī)藥、紡織及日化用品行業(yè)。

三、自備儀器或用品：

天平、恒溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿

（光徑1cm）、恒溫水浴鍋。

四、試劑盒組成(50T/24 樣)：

提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體30mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×2瓶，4℃保存。臨用前加入12.5mL試劑一，

50°加熱溶解，保存一周。

試劑三：液體30mL×1 瓶，4℃避光保存。

五、粗酶液提取:

1．組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10 的

比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)

行冰浴勻漿，10000g 4℃離心10min，取上清，置冰

上待測(cè)。

2．細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10 4個(gè)）：提取液體積（ml）

為500～1000:1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取

液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300W，超聲3秒，

間隔7秒，總時(shí)間3分鐘）；然后10000g，4℃離心10

分鐘，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)液：直接檢測(cè)。

八、注意事項(xiàng)：

1. 試劑一若有沉淀析出，請(qǐng)置于50℃加熱溶解。

2. 測(cè)定之前請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果吸光值較高或較低，請(qǐng)用提

取液做適當(dāng)?shù)南♂尰蛘呒哟髽颖玖?，并在?jì)算公式中乘以

稀釋倍數(shù)或者以實(shí)際加入的樣本體積參與計(jì)算。

3. 煮沸樣本建議在沸水中煮沸10分鐘，以將酶滅活。

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