琥珀酸脫氫酶（SDH）測(cè)試盒

（50T/48 樣）

一、測(cè)定原理：

琥珀酸脫氫酶（SDH）催化底物反應(yīng)，FAD 是該

反應(yīng)的輔基，FAD 被還原成 FADH，該反應(yīng)與 2,6- DPIP

的還原相偶聯(lián)，測(cè)定 2,6-DPIP 的還原速度可以推算出

SDH 的活力。

二、試劑組成與配制：（50T/48 樣）

試劑一：液體 60mL×2 瓶，4℃冷藏 3 個(gè)月；

試劑二：液體 6mL×1 瓶，避光 4℃冷藏 3 個(gè)月；

試劑三：液體 6mL×1 瓶，避光 4℃冷藏 3 個(gè)月；

試劑四：液體 6mL×2 瓶，避光 4℃冷藏 3 個(gè)月；

試劑五：液體 6mL×1 瓶，避光-20℃冷藏 3 個(gè)月，如需分

多次使用，建議老師將試劑五分裝后冷凍保存，

避免多次的反復(fù)凍融；

試劑六：液體 6mL×1 瓶，4℃冷藏 3 個(gè)月。

工作液的配制:按試劑一:試劑二:試劑三:試劑四:試劑五:試

劑六=2 : 0.1 : 0.1 : 0.2 : 0.1 : 0.1 的比例進(jìn)行配

制,用多少配多少,現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后一定要避光。

三、操作步驟：

a、將可見分光光度計(jì)于 600nm 處,1cm 光徑比色皿,以雙蒸

水調(diào)零 (比色皿準(zhǔn)備兩只,一只用于調(diào)零,一只用于測(cè)

定)。

b、將工作液，37℃預(yù)溫 5 分鐘以上。

c、往相應(yīng)編號(hào)的試管中加入 100μL 待測(cè)樣本，用 5mL 移

液器吸取 2.6mL 工作液迅速?zèng)_入試管中，立即混勻并

計(jì)時(shí)。

d、迅速倒入比色皿中在可見分光光度計(jì) 600nm 處比色，5

秒時(shí)讀取吸光度值（A1值）,在 1 分 5 秒時(shí)再次測(cè)定吸

光度值（A2 值）；

e、求出 2 次吸光度差值（△A=A1-A2）。

注意點(diǎn)：

①、工作液一定要避光保存,測(cè)定過(guò)程中工作液同樣要

避光;

②、比色皿必須用自來(lái)水沖洗干凈，再用雙蒸水洗 2～

3 次后，才能對(duì)下一個(gè)樣本進(jìn)行檢測(cè);

③、在比色皿中加完樣后，下一步加試劑與按秒表需

同步;

④、在比色皿中加完試劑后，必須快速放入分光光度

計(jì)的比色槽中;

⑤、試劑二、試劑三、試劑四、試劑五必須避光冷藏;

⑥、配好的混合試劑在測(cè)定前必須預(yù)溫。

 琥珀酸脫氫酶（SDH）測(cè)試盒