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標(biāo)題《異補(bǔ)骨脂甲素調(diào)控miR-124對小鼠胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響》

摘要：目的探討異補(bǔ)骨脂甲素(isobavachin,IBA)調(diào)控微小RNA-124(miR-124)對小鼠J1胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響。方法采用qRT-PCR和免疫熒光染色分別檢測IBA干預(yù)或抑制miR-124表達(dá)的J1細(xì)胞中miR-124、八聚體轉(zhuǎn)錄因子4(octamer transcription factor-4,OCT4)和神經(jīng)微絲H(neurofilament-H, NFH)的表達(dá)。使用Targetscan在線預(yù)測、雙熒光素酶報告基因和Western blot實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-124和鋅指蛋白18(zinc finger and BTB domain containing 18, ZBTB18)的靶向關(guān)系。在J1細(xì)胞中轉(zhuǎn)染pcDNA-ZBTB18或miR-124 mimics、ZBTB18 shRNA,免疫熒光染色檢測細(xì)胞中OCT4和NFH的表達(dá)。結(jié)果 IBA可顯著抑制J1細(xì)胞中OCT4蛋白表達(dá),并上調(diào)miR-124和NFH表達(dá);而抑制miR-124表達(dá)后所得結(jié)果相反。miR-124可靶向調(diào)控ZBTB18蛋白表達(dá)。在J1細(xì)胞中過表達(dá)ZBTB18,OCT4陽性表達(dá)率升高而NFH陽...

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