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鈣離子檢測試劑盒,鈣離子試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

點擊次數(shù):2003     更新時間:2017-02-15

鈣離子檢測試劑盒,鈣離子試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

鈣離子檢測試劑盒說明書

一.檢測原理:樣本中鈣離子在堿性溶液中與甲基百里香酚藍(MTB)結(jié)合,生成藍色絡(luò)合物;
通過比色與同樣處理的鈣標準溶液進行比較,可計算出樣本中鈣的含量。
二.測定范圍:本試劑盒可以測定各類動物血清(漿)、組織等樣本中鈣的含量。
三.自備儀器和用品:
酶標儀(610nm)、微量移液器、漩渦混勻器
四.試劑組成:
96T 規(guī)格組分保存
試劑一10mlX1 瓶MTB 試劑4℃避光保存6 個月
試劑二20mlX1 瓶堿性溶液室溫保存6 個月
試劑三1mlX1 瓶蛋白澄清劑室溫保存6 個月
試劑四1mlX1 支2.5mmol/L 鈣標準液4℃避光保存6 個月
1mmol/L 鈣標準液的配制: 用去離子水將2.5mmol/L 鈣標準液進行2.5 倍稀釋(即2:3 稀釋)
工作液I 的配制: 試劑一:試劑二= 1:2 的比例進行配制,現(xiàn)用現(xiàn)配(測血清、血漿樣本)
工作液II 的配制: 試劑一:試劑二:試劑三=10:20:1 的比例進行配制,現(xiàn)配現(xiàn)用(測組織樣本)
五.樣本要求:
A.按常規(guī)檢驗要求采集處理樣本,樣本可以是血清、血漿、組織勻漿及細胞培養(yǎng)上清。
B.樣本2-8℃可穩(wěn)定3-4 天,-20℃以下可穩(wěn)定數(shù)月。
六.測定步驟
A.血清(漿)操作步驟
空白孔標準孔測定孔
去離子水(ul) 10
1mmol/L 鈣標準液(ul) 10
血清(漿) 10
工作液I(ul) 250 250 250
混勻,靜置5 分鐘,波長610nm,酶標儀測定各孔的OD 值。
注:實驗前可先將96 孔板用酶標儀讀取并記錄空白OD 值,以保證實驗的度。

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計算公式:
B.組織或細胞勻漿的操作步驟
(1)前處理:準確稱取組織重量按重量(g):體積(ml)=1:9 的比例加入9 倍體積的去離
子水,冰水浴勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心10 分鐘,取10%的勻漿上清液待測。
(2)操作:見說明書

注:實驗前可先將96 孔板用酶標儀讀取并記錄空白OD 值,以保證實驗的度。
計算公式:
注:*gprot/L 為克蛋白/升
七.注意事項:
1.實驗應(yīng)避免鈣污染,建議用一次性96 孔板操作。
2.嚴重溶血,黃疸或脂血對結(jié)果有影響。
3.制備組織勻漿時,應(yīng)選用去離子水作為勻漿介質(zhì),避免鈣污染。
4.本試劑盒可上全自動/半自動生化分析儀
5.測定組織或細胞中鈣離子含量,同時測定總蛋白濃度。
6.本試劑盒僅用于科研。
 

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