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ELISA實驗中如何正確采取標本

點擊次數(shù):677     更新時間:2022-09-26

ELISA實驗中如何正確采取標本


標本的采取和保存


大部分ELISA 檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅
細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP 為標記的ELISA 測定中,溶血標本
可能會增加非特異性顯色。


血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源
性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。一般說來,在5 天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,標本在
冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需-20
℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。


混濁或有沉淀的血清標本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操
作,也可加入適當防腐劑??鼓?的標本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。


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